RNA原位杂交(RNA-ISH)
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原理
RNA原位杂交(RNA in situ Hybridization, RNA-ISH)是一种利用核酸碱基互补配对原则,在组织、细胞或胚胎原位上检测特定内源性RNA表达与分布情况的分子细胞生物学技术。
应用范围
基因功能研究、发育生物学、植物/动物组织特定基因表达模式研究、空间转录组和单细胞转录组marker基因验证。
服务内容
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项目
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服务内容
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服务周期
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探针设计与合成
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设计特异性探针并体外转录合成dig标记探针
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1-2月
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样品固定与包埋
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样本固定-脱水-透明-浸蜡-石蜡包埋
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切片
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切片厚度8-20um
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样本预处理
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脱蜡-水化-蛋白酶消化-乙酰化处理
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杂交
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探针与样本进行杂交
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显色
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RNA酶消化-封闭-抗体孵育-NBT/BCIP显色
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显微成像
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封片,显微拍照
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交付
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1)剩余探针;
2)剩余的石蜡包埋样本;
3)实验报告1份;
4)树脂封片的切片和显微图像。
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结果展示

送样标准
(1)提供新鲜固定(4%多聚甲醛或FAA固定液)的组织,大小不超过1cm3,抽真空后立刻冰袋快递寄出;
(2)提供详细的样本信息以及目标基因序列信息和基因号;
(3)高质量cDNA,冰袋寄送。